研究題目
患者検体を用いた自己免疫性皮膚疾患発症機序の解明
研究概要
目的: 自己免疫性皮膚疾患である天疱瘡では自己抗原であるデスモグレインに対する自己抗体が産生することで発症する。臨床的にはB細胞を標的とする治療が効果的であることがわかっており、デスモグレイン特異的B細胞が病態に重要な役割を担っていると考えられる。本研究では、標識をつけたデスモグレイン蛋白を使って患者末梢血中のデスモグレイン特異的B細胞を単離し、網羅的遺伝子解析をすることでその特性や治療による遺伝子発現変化を解析し、病勢マーカーや治療に結びつけることを目的としている。
研究方法: 標識したデスモグレイン蛋白またはインフルエンザHA抗原を用いてPBMCから抗原特異的B細胞をFACS ARIA3でシングルセルソートを実施し、SMART-seqでライブラリを作成し、Novaseqにてシークエンスを行った。
対象: 3例の天疱瘡患者からデスモグレイン特異的B細胞ならびに非デスモグレイン特異的B細胞。内1例は治療開始後のデスモグレイン特異的B細胞と非デスモグレイン特異的B細胞。 コントロールとして3例の健常人から取得したインフルエンザHA特異的B細胞と非インフルエンザHA特異的B細胞
