NBDC Research ID: hum0366.v1

 

研究内容の概要

目的: 新型コロナウイルス感染症(COVID-19)の病態生理及びコロナワクチン接種後の免疫動態を解析し、臨床分野での応用を目指す。

方法: single cell RNA-seq:COVID-19患者16症例(ARDS合併;8症例、ARDS非合併;8症例)と対照健常者5名の末梢血単核球をシングルセルRNA sequenceで解析。

            RNA-seq:健常者4名の末梢血単核球由来の単球から抽出したtotal RNAをRNA sequenceで解析。

            ATAC-seq:健常者5名の末梢血単核球由来の単球から抽出したDNAをATAC sequenceで解析。

対象: single cell RNA-seq: COVID-19患者: 16症例(ARDS合併;8例、ADRS非合併;8例)、対照健常者: 5名

            RNA-seq:健常者4名(各4検体、いずれも末梢血)

            ATAC-seq:健常者5名(各4ないしは5検体、いずれも末梢血)

 

データID内容制限公開日
E-GEAD-551 NGS(scRNA-seq) 非制限公開 2023/03/16
E-GEAD-552

NGS(RNA-seq)

NGS(ATAC-seq)

非制限公開 2023/03/16

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分子データ

scRNA-seq

対象

COVID-19患者 (ICD10:U07.1):16症例

    ARDS合併:8症例

    ARDS非合併:8症例

対照健常者:5名

規模 scRNA-seq
対象領域(Target Captureの場合) -
Platform Illumina [NovaSeq 6000]
ライブラリソース 末梢血単核細胞から抽出したRNA
検体情報(購入の場合) -
ライブラリ作製方法(キット名) Chromium Next GEM Single Cell 5′ Library & Gel Bead Kit v1.1、Chromium Next GEM Chip G Single Cell Kit、Single Index Kit T Set A
断片化の方法 酵素反応
ライブラリ構築方法 Paired-end
リード長(除:バーコード、アダプタ、プライマー、リンカー)

Read1:26 bp

Read2:91 bp

マッピング方法 STAR
リファレンス配列 GRCh38
リードカウント決定アルゴリズム(ソフトウェア) dropEst
フィルタリング(QC)方法 UMI値が1,000未満または20,000以上の細胞、およびミトコンドリア遺伝子またはヘモグロビン遺伝子からのリードが10%以上含まれる細胞はlow qualityと判断し、解析から除外した。また、各サンプル毎にScrubletを用いて、推定ダブレットを除去した。
遺伝子数 24,541 genes
Genomic Expression Archive ID E-GEAD-551
総データ量 2.3495 GB(txt)
コメント(利用にあたっての制限事項) NBDC policy

 

RNA-seq

対象 健常者:4名(各4検体)
規模 RNA-seq
対象領域(Target Captureの場合) -
Platform Illumina [NovaSeq 6000]
ライブラリソース 末梢血単核細胞由来の単球から抽出したRNA
検体情報(購入の場合) -
ライブラリ作製方法(キット名) Nextera XT DNA Library Preparation Kit
断片化の方法 Tagmentation(Nextera XT DNA Library Preparation Kit)
ライブラリ構築方法 Paired-end
リード長(除:バーコード、アダプタ、プライマー、リンカー) 101 bp
マッピング方法 HISAT2
リファレンス配列 hg38
リードカウント決定アルゴリズム(ソフトウェア) featureCounts(version 1.6.3)
フィルタリング(QC)方法 Trimmomatic software(version 0.38)を用いて、Low-quality(<20)塩基とアダプター配列を除去した。(設定パラメータは以下の通り: ILLUMINACLIP: path/to/adapter.fa:2:30:10 LEADING:20 TRAILING:20 SLIDINGWINDOW:4:15 MINLEN:36)
遺伝子数 31,706 genes
Genomic Expression Archive ID E-GEAD-552
総データ量 2.3495 GB(txt)
コメント(利用にあたっての制限事項) NBDC policy

 

ATAC-seq

対象 健常者:5名(各4検体ないしは5検体)
規模 ATAC-seq
対象領域(Target Captureの場合) -
Platform Illumina [NovaSeq 6000]
ライブラリソース 末梢血単核細胞由来の単球から抽出したDNA
検体情報(購入の場合) -
ライブラリ作製方法(キット名) ATAC-Seq Kit
断片化の方法 Tagmentation(ATAC-Seq Kit)
ライブラリ構築方法 Paired-end
リード長(除:バーコード、アダプタ、プライマー、リンカー) 150 bp
マッピング方法 Bowtie2
リファレンス配列 hg38
オープンクロマチン領域決定アルゴリズム(ソフトウェア) featureCounts(version 1.6.3)
フィルタリング(QC)方法 Trimmomatic software(version 0.38)を用いて、Low-quality(<20)塩基とアダプター配列を除去した。(設定パラメータは以下の通り: ILLUMINACLIP: path/to/adapter.fa:2:30:10 LEADING:20 TRAILING:20 SLIDINGWINDOW:4:15 MINLEN:36)
peak数 33548 peaks
Genomic Expression Archive ID E-GEAD-552
総データ量 2.3495 GB(txt)
コメント(利用にあたっての制限事項) NBDC policy

 

提供者情報

研究代表者: 加藤 保宏

所 属 機 関: 大阪大学大学院医学系研究科 呼吸器・免疫内科学

プロジェクト/研究グループ名: -

科研費/助成金(Research Project Number):

科研費・助成金名タイトル研究課題番号
科学研究費助成事業 基盤研究(S) 神経・免疫・代謝におけるガイダンス因子の病的意義の解明とその制御 18H05282

 

関連論文

タイトルDOIデータID
1 Consecutive BNT162b2 mRNA vaccination induces short-term epigenetic memory in innate immune cells doi: 10.1172/jci.insight.163347 E-GEAD-551
E-GEAD-552
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