NBDC Research ID: hum0201.v6

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研究内容の概要

目的: 消化管上皮細胞の、正常組織・炎症組織(消化器炎症性疾患)・腫瘍組織のゲノム解析による形質上の相違の探索

方法:

JGAS000199:腸管上皮細胞の疾患組織(腫瘍・炎症部位)および正常組織から樹立したオルガノイド、末梢血、および、疾患組織から抽出したDNAを用いたWhole Exome sequecing解析

JGAS000237:腫瘍性疾患の腫瘍組織および非腫瘍組織より樹立したオルガノイドおよび末梢血から抽出したDNA、RNAを用いたWhole Genome sequecing解析、RNA sequecing解析

JGAS000256:培養液のローテーションによる遺伝子発現変化の検出を目的とした、2D培養した正常十二指腸オルガノイドから抽出したRNAを用いたRNA sequecing解析

JGAS000378:大腸腫瘍組織および非腫瘍組織由来のオルガノイドならびにBromodomain and extraterminal(BET)ブロモドメイン選択的阻害((+)-JQ1)を添加した大腸腫瘍組織および非腫瘍組織由来のオルガノイドを用いたRNA sequencing解析、ならびにChip-seq解析

JGAS000350:大腸腫瘍由来のオルガノイドを用いたRNA sequencing解析

JGAS000550:腫瘍性疾患を有する患者の正常大腸組織を用いたsingle cell RNA sequecing解析および正常大腸オルガノイドを用いたRNA sequencingとWhole Exome sequencing解析

対象:

JGAS000199:潰瘍性大腸炎29症例、腫瘍を併発する潰瘍性大腸炎26症例、下部消化管内視鏡検査を受けた健常者16名

JGAS000237:腫瘍性疾患23症例

JGAS000256:腫瘍性疾患1症例1検体の正常十二指腸組織

JGAS000378:腫瘍性疾患4症例の腫瘍組織4検体および非腫瘍組織 (正常大腸上皮)1検体

JGAS000350:腫瘍性疾患2症例11検体(1症例から2検体、もう1症例から9検体)

JGAS000550:腫瘍性疾患3症例17検体の正常大腸組織

 

データID内容制限公開日
JGAS000199 NGS(Exome 制限公開(Type I) 2019/12/20
JGAS000237 NGS(WGSRNA-seq 制限公開(Type I) 2020/10/06
JGAS000256 NGS(RNA-seq 制限公開(Type I) 2020/11/20
JGAS000378 NGS(RNA-seqChIP-seq 制限公開(Type I) 2021/11/19
JGAS000350 NGS(RNA-seq 制限公開(Type I) 2022/06/06
JGAS000550 NGS(scRNA-seqRNA-seqExome 制限公開(Type I) 2022/08/05

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分子データ

Exome(JGAS000199/JGAS000550)

対象

潰瘍性大腸炎(ICD10:K51):29症例

 (炎症組織のオルガノイド11検体、非炎症組織のオルガノイド14検体、末梢血12検体)

腫瘍を併発する潰瘍性大腸炎(ICD10:K51, C18, C19, C20):26症例

 (腫瘍組織のオルガノイド15検体、炎症組織のオルガノイド14検体、非炎症組織のオルガノイド5検体、末梢血10検体)

腫瘍性疾患(ICD10:C18):2症例

 (正常大腸組織のオルガノイド8検体)

下部消化管内視鏡検査を受けた健常者:16名

 (末梢血10検体、正常組織のオルガノイド24検体)

規模 Exome
対象領域(Target Captureの場合) -
Platform Illumina [HiSeq 2500/4000]
ライブラリソース 疾患組織(腫瘍組織・炎症組織)・正常組織から樹立したオルガノイド、末梢血、および、疾患組織から抽出したDNA
検体情報(購入の場合) -
ライブラリ作製方法(キット名) SureSelect Human All Exon kit
断片化の方法 超音波断片化
ライブラリ構築方法 Paired-end
リード長(除:バーコード、アダプタ、プライマー、リンカー) 200 bp
Japanese Genotype-phenotype Archive Data set ID

JGAD000284

JGAD000669

総データ量

JGAD000284:488 GB(fastq)

JGAD000669:59.5 GB(fastq)

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WGS(JGAS000237)

対象

腫瘍性疾患:23症例(55検体)

(腫瘍組織および非腫瘍組織より樹立したオルガノイドおよび末梢血)

    小細胞肺がん(ICD10:C34)

    胆道がん(ICD10:C23, C24, C78)

    大腸がん(ICD10:C18-20)

    十二指腸がん(ICD10:C17)

    食道がん(ICD10:C15)

    胃がん(ICD10:C16, C78)

    肝がん(ICD10:C22)

    膵がん(ICD10:C25)

規模 WGS
対象領域(Target Captureの場合) -
Platform Illumina [HiSeq X Ten]
ライブラリソース 腫瘍組織および非腫瘍組織より樹立したオルガノイドおよび末梢血から抽出したDNA
検体情報(購入の場合) -
ライブラリ作製方法(キット名) BGIによって作成されたライブラリーを使用
断片化の方法 超音波断片化
ライブラリ構築方法 Paired-end
リード長(除:バーコード、アダプタ、プライマー、リンカー) 300 bp
Japanese Genotype-phenotype Archive Data set ID JGAD000335
総データ量 2.752 TB(fastq)
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RNA-seq(JGAS000237、JGAS000378)

対象

腫瘍性疾患:23+4症例(35+5検体)

(腫瘍組織39検体および非腫瘍組織 [正常大腸上皮] 1検体より樹立したオルガノイド)

    小細胞肺がん(ICD10:C34)

    胆道がん(ICD10:C23, C24, C78)

    大腸がん(ICD10:C18-20)

    十二指腸がん(ICD10:C17)

    食道がん(ICD10:C15)

    胃がん(ICD10:C16, C78)

    肝がん(ICD10:C22)

    膵がん(ICD10:C25)

規模 RNA-seq
対象領域(Target Captureの場合) -
Platform Illumina [HiSeq 2500/X Ten、NovaSeq 6000]
ライブラリソース

腫瘍組織および非腫瘍組織(正常大腸上皮)より樹立したオルガノイドから抽出したRNA

BET阻害剤を添加した大腸腫瘍組織および非腫瘍組織(正常大腸上皮)由来のオルガノイドから抽出したRNA

検体情報(購入の場合) -
ライブラリ作製方法(キット名)

TruSeq RNA Library Prep Kit v2

TruSeq Stranded mRNA Library Prep Kit

断片化の方法 熱処理
ライブラリ構築方法 Paired-end
リード長(除:バーコード、アダプタ、プライマー、リンカー) 250 bp/150 bp
Japanese Genotype-phenotype Archive Data set ID

JGAD000336

JGAD000492

総データ量

JGAD000336:2.752 TB(fastq)

JGAD000492:190.5 GB(fastq)

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RNA-seq(JGAS000256)

対象

腫瘍性疾患(ICD10:C16):1症例(1検体)

(正常十二指腸組織より樹立したオルガノイド)

規模 RNA-seq
対象領域(Target Captureの場合) -
Platform Illumina [HiSeq X Ten]
ライブラリソース

正常十二指腸組織より樹立したオルガノイドから抽出したRNA

4日間の培養液ローテーションあり、なし、およびローテーションから0、1、2、4日後(6条件)

検体情報(購入の場合) -
ライブラリ作製方法(キット名)

TruSeq RNA Library Prep Kit v2

TruSeq Stranded mRNA Library Prep Kit

断片化の方法 熱処理
ライブラリ構築方法 Paired-end
リード長(除:バーコード、アダプタ、プライマー、リンカー) 250 bp/150 bp
Japanese Genotype-phenotype Archive Data set ID JGAD000359
総データ量 37 GB(fastq)
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RNA-seq(JGAS000350)

対象

腫瘍性疾患(ICD10:C16):2症例(11検体)

(大腸腫瘍組織より樹立したオルガノイド)

規模 RNA-seq
対象領域(Target Captureの場合) -
Platform Illumina [HiSeq 4000]
ライブラリソース

大腸腫瘍組織より樹立したオルガノイドから抽出したRNA

幾つかの条件(抗がん剤投与など)を振って培養した後の細胞、並びに、マーカーを使って分取した細胞集団

検体情報(購入の場合) -
ライブラリ作製方法(キット名)

TruSeq RNA Library Prep Kit v2

TruSeq Stranded mRNA Library Prep Kit

断片化の方法 熱処理
ライブラリ構築方法 Paired-end
リード長(除:バーコード、アダプタ、プライマー、リンカー) 250 bp/150 bp
Japanese Genotype-phenotype Archive Data set ID JGAD000464
総データ量 108.9 GB (fastq)
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RNA-seq(JGAS000550)

対象

腫瘍性疾患(ICD10:C18):2症例(8検体)

(正常大腸組織より樹立したオルガノイド)

規模 RNA-seq
対象領域(Target Captureの場合) -
Platform Illumina [NovaSeq 6000]
ライブラリソース 正常大腸組織より樹立したオルガノイドから抽出したRNA
検体情報(購入の場合) -
ライブラリ作製方法(キット名)

TruSeq RNA Library Prep Kit v2

TruSeq Stranded mRNA Library Prep Kit

断片化の方法 熱処理
ライブラリ構築方法 Paired-end
リード長(除:バーコード、アダプタ、プライマー、リンカー) 150 x 2 bp
Japanese Genotype-phenotype Archive Data set ID JGAD000669
総データ量 46.6 GB(fastq)
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scRNA-seq(JGAS000550)

対象

腫瘍性疾患(ICD10:C16):1症例(1検体)

(正常大腸組織)

規模 scRNA-seq
対象領域(Target Captureの場合) -
Platform Illumina [HiSeq 4000]
ライブラリソース 正常大腸組織から抽出したRNA
検体情報(購入の場合) -
ライブラリ作製方法(キット名) Single Cell 3′ Library & Gel Bead Kit v2 and the A Chip Kit (10X Genomics)
断片化の方法 酵素処理
ライブラリ構築方法 Paired-end
リード長(除:バーコード、アダプタ、プライマー、リンカー) 28+91 bp
Japanese Genotype-phenotype Archive Data set ID JGAD000669
総データ量 66.0 GB (fastq)
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ChIP-seq(JGAS000378)

対象

腫瘍性疾患:4症例(5検体)

(腫瘍組織4検体および非腫瘍組織 [正常大腸上皮] 1検体より樹立したオルガノイド)

    大腸がん(ICD10:C18)

規模 ChIP-seq
対象領域(Target Captureの場合) -
Platform Illumina [HiSeq X Ten]
ライブラリソース 腫瘍組織非腫瘍組織(正常大腸上皮)より樹立したオルガノイドから抽出したDNAに対し、抗ヒストン抗体(H3K27Ac)を用いて免疫沈降
検体情報(購入の場合) -
ライブラリ作製方法(キット名) Illumina Tagment DNA TDE1 Enzyme and Buffer Kits
断片化の方法 超音波断片化(Bioruptor Ⅱ)
ライブラリ構築方法 Paired-end
リード長(除:バーコード、アダプタ、プライマー、リンカー) 150 bp
Japanese Genotype-phenotype Archive Data set ID JGAD000492
総データ量 190.5 GB(fastq)
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提供者情報

研究代表者: 佐藤 俊朗

所 属 機 関: 慶應義塾大学医学部 坂口光洋記念講座(オルガノイド医学)

プロジェクト/研究グループ名: -

科研費/助成金(Research Project Number):

科研費・助成金名タイトル研究課題番号
日本医療研究開発機構(AMED) 老化メカニズムの解明・制御プロジェクト 消化器疾患発症制御を目指した加齢形質変化の理解 JP19gm5010002
日本医療研究開発機構(AMED) 次世代がん医療創生研究事業(P-CREATE) がん多階層フェノタイプの理解に基づいた先端的創薬システムの開発 JP19cm0106206
日本医療研究開発機構 革新的先端研究開発支援事業(AMED-CREST) 新しい4次元モデルシステムを用いた腸管線維化疾患の病態解明 JP19gm1210001
科学研究費助成事業 基盤研究(S) オルガノドライブラリーの構築による消化器疾患形質の統合的理解 17H06176
科学研究費助成事業 基盤研究(B) 小腸上皮オルガノイドにより創出した移植グラフトの機能解析 20H03746
科学研究費助成事業 基盤研究(S) ニッチ構築によるヒト消化器疾患の発症・進展のメカニズムを解き明かす 22H04995

 

関連論文

タイトルDOIデータID
1 Somatic inflammatory gene mutations in human ulcerative colitis epithelium doi: 10.1038/s41586-019-1844-5 JGAD000284
2 An Organoid Biobank of Neuroendocrine Neoplasms Enables Genotype-Phenotype Mapping doi: 10.1016/j.cell.2020.10.023

JGAD000335

JGAD000336

3 An organoid-based organ repurposing approach to treat short bowel syndrome doi: 10.1038/s41586-021-03247-2 JGAD000359
4 Organoid screening reveals epigenetic vulnerabilities in human colorectal cancer doi: 10.1038/s41589-022-00984-x JGAD000492

 

制限公開データの利用者一覧

研究代表者所属機関研究題目利用データID利用期間
Klaus H. Kaestner Institue for Diabetes, Obesity & Metabolism at Unversity of Pennsylvania Somatic mutation analysis of the pancreas in type 1 diabetes JGAD000284 2020/04/13-2021/03/03
Ulf Leser Department of Mathematics and Computer Science, Humboldt-Universitaet zu Berlin MAPTor-NET: MAPK-mTOR network model driven individualized therapies of pancreatic neuro-endocrine tumors (pNETs)

JGAD000335

JGAD000336

2021/06/03-2023/04/01