NBDC Research ID: hum0130.v3
研究内容の概要
目的： POEMS症候群（polyneuropathy, organomegaly, endocrinopathy, M-Protein, and skin changes syndrome）における形質細胞の遺伝学的特徴を他の形質細胞性疾患と比較する。POEMS症候群患者の骨髄形質細胞におけるWhole Exome Sequencing, 標的シークエンス、bulk RNAシークエンス、更にシングルセルRNAシークエンスを行い、POEMSクローンの遺伝子発現の特徴を明らかにすることで、本疾患の分子病態解明を行う。
方法： POEMS症候群における形質細胞のゲノム解析および3疾患（POEMS症候群、多発性骨髄腫、単クローン性免疫グロブリン血症 [monoclonal gammopathy of undetermined significance：MGUS]）の遺伝子発現解析。患者骨髄からCD138陽性形質細胞をMACSとFACSによって純化し、Fluidigm C1を用いてシングルセルソートとライブラリー作成を行い、Illumina HiSeq 3000にてRNAシークエンスを行った。また、SMART-Seq v4 Ultra Low Input RNA Kit for Sequencing、NEBNext Ultra DNALibrary Prep Kitを用いてライブラリーを作成し、Illumina HiSeq 2000にてRNAシークエンスを行った。骨髄腫浸潤のない早期リンパ腫３症例の骨髄形質細胞からCD138陽性形質細胞をMACSとFACSによって純化し、抽出したRNAを用いたRNAシークエンスを行った。
対象： POEMS症候群、多発性骨髄腫、MGUS、正常コントロール（骨髄浸潤のない悪性リンパ腫）の形質細胞。症例数は個別に記載。
| データID | 内容 | 制限 | 公開日 |
|---|---|---|---|
| JGAS000150 | NGS（Exome、Target Capture、RNA-seq） | 制限公開（Type I） | 2019/01/18 |
| JGAS000289 | NGS（scRNA-seq、bulk RNA-seq） | 制限公開（Type I） | 2022/09/27 |
| JGAS000150（データ追加） | NGS（RNA-seq） | 制限公開（Type I） | 2024/06/17 |
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分子データ
| 対象 | POEMS症候群（ICD10：C90.2）：15症例 |
| 規模 | Exome |
| 対象領域（Target Captureの場合） | Coding exons |
| Platform | Illumina [HiSeq 2500] |
| ライブラリソース | POEMS症候群の腫瘍細胞（骨髄形質細胞）と正常細胞（頬粘膜細胞）から抽出したDNA |
| 検体情報（購入の場合） | - |
| ライブラリ作製方法（キット名） | SureSelect Human ALL Exon V5 |
| 断片化の方法 | 超音波断片化 |
| ライブラリ構築方法 | Paired-end |
| リード長（除：バーコード、アダプタ、プライマー、リンカー） | 121 bp |
| Japanese Genotype-phenotype Archive Dataset ID | JGAD000226 |
| 総データ量 | 171 GB（bam [ref: hg19]） |
| コメント（利用にあたっての制限事項） | NBDC policy |
| 対象 | POEMS症候群（ICD10：C90.2）：20症例 |
| 規模 | Target Capture |
| 対象領域（Target Captureの場合） | Coding exons of selected genes |
| Platform | Illumina [MiSeq] |
| ライブラリソース | POEMS症候群の腫瘍細胞（骨髄形質細胞）と正常細胞（頬粘膜細胞）から抽出したDNA |
| 検体情報（購入の場合） | - |
| ライブラリ作製方法（キット名） | custom designed SureSelect XT2 Kit |
| 断片化の方法 | 超音波断片化 |
| ライブラリ構築方法 | Paired-end |
| リード長（除：バーコード、アダプタ、プライマー、リンカー） | 273 bp |
| Japanese Genotype-phenotype Archive Dataset ID | JGAD000226 |
| 総データ量 | 171 GB（bam [ref: hg19]） |
| コメント（利用にあたっての制限事項） | NBDC policy |
| 対象 |
POEMS症候群（ICD10：C90.2）：5症例 多発性骨髄腫（ICD10：C90.0）：4症例 MGUS（ICD10：D47.2）：5症例 正常コントロール （骨髄浸潤のない悪性リンパ腫）：3症例 |
| 規模 | RNA-seq |
| 対象領域（Target Captureの場合） | - |
| Platform | Illumina [HiSeq1500] |
| ライブラリソース | POEMS症候群、多発性骨髄腫、MGUS、骨髄浸潤のない悪性リンパ腫の腫瘍細胞（骨髄形質細胞）から抽出したRNA |
| 検体情報（購入の場合） | - |
| ライブラリ作製方法（キット名） | SMART-Seq v4 Ultra Low Input RNA Kit for Sequencing、NEBNext Ultra DNALibrary Prep Kit |
| 断片化の方法 | 超音波断片化 |
| ライブラリ構築方法 | Single-end |
| リード長（除：バーコード、アダプタ、プライマー、リンカー） | 60 bp |
| Japanese Genotype-phenotype Archive Dataset ID | JGAD000226 |
| 総データ量 | 171＋ 2.2 GB（fastq） |
| コメント（利用にあたっての制限事項） | NBDC policy |
| 対象 |
POEMS症候群（ICD10：C90.2）：4症例 多発性骨髄腫（ICD10：C90.0）：3症例 正常コントロール（骨髄浸潤のないリンパ腫）：2症例 |
| 規模 | RNA-seq |
| 対象領域（Target Captureの場合） | - |
| Platform | Illumina [HiSeq 2000] |
| ライブラリソース | POEMS症候群、多発性骨髄腫、骨髄浸潤のない悪性リンパ腫の腫瘍細胞（CD138陽性骨髄形質細胞）から抽出したRNA |
| 検体情報（購入の場合） | - |
| ライブラリ作製方法（キット名） | SMART-Seq v4 Ultra Low Input RNA Kit for Sequencing、NEBNext Ultra DNALibrary Prep Kit |
| 断片化の方法 | 超音波断片化 |
| ライブラリ構築方法 | Single-end |
| リード長（除：バーコード、アダプタ、プライマー、リンカー） | 60 bp |
| Japanese Genotype-phenotype Archive Dataset ID | JGAD000395 |
| 総データ量 | 12.6 GB（fastq） |
| コメント（利用にあたっての制限事項） | NBDC policy |
| 対象 |
POEMS症候群（ICD10：C90.2）：11症例（うち1症例はJGAD000226と重複） 多発性骨髄腫（ICD10：C90.0）：2症例 MGUS（ICD10：D47.2）：2症例 正常コントロール （骨髄浸潤のない悪性リンパ腫）：2症例 |
| 規模 | scRNA-seq |
| 対象領域（Target Captureの場合） | - |
| Platform | Illumina [HiSeq 3000] |
| ライブラリソース | POEMS症候群、多発性骨髄腫、MGUS、骨髄浸潤のない悪性リンパ腫の腫瘍細胞（CD138陽性骨髄形質細胞）から抽出したRNA |
| 検体情報（購入の場合） | - |
| ライブラリ作製方法（キット名） | Fluidigm C1 |
| 断片化の方法 | Tagmentation using Nextera XT DNA Sample Preparation kit（Illumina） |
| ライブラリ構築方法 | Paired-end |
| リード長（除：バーコード、アダプタ、プライマー、リンカー） | 100 bp x 2 |
| Japanese Genotype-phenotype Archive Dataset ID | JGAD000395 |
| 総データ量 | 350.5 GB（fastq） |
| コメント（利用にあたっての制限事項） | NBDC policy |
提供者情報
研究代表者： 堺田 恵美子
所 属 機 関： 千葉大学大学院医学研究院・細胞治療内科学（千葉大学病院 血液内科）
プロジェクト/研究グループ名： -
科研費/助成金（Research Project Number）：
| 科研費・助成金名 | タイトル | 研究課題番号 |
|---|---|---|
| 科学研究費助成事業 基盤研究（C） | 骨髄微少環境と形質細胞の相互作用に基づいたPOEMS症候群の発症機構の解明 | 26461397 |
| 科学研究費助成事業 基盤研究（C） | 次世代シークエンサーによるMRD検出法に基づくPOEMS症候群の治療戦略の確立 | 15K09494 |
| 科学研究費助成事業 基盤研究（C） | 骨髄形質細胞シングルセル解析によるPOEMS症候群の分子病態の解明 | 18K08338 |
| 科学研究費助成事業 新学術領域研究（研究領域提案型）『学術研究支援基盤形成』 | 先進ゲノム解析研究推進プラットフォーム | 16H06279 |
| 科学研究費助成事業 基盤研究（S） | 造血幹細胞エイジングを規定するエピジェネティック機構の統合的理解 | 19H05653 |
| 科学研究費助成事業 新学術領域研究（研究領域提案型） | 幹細胞の運命決定に関わるクロマチン複製機構の解明 | 19H05746 |
| 科学研究費助成事業 基盤研究（C） | POEMS症候群における微小クローン同定による診断治療戦略の確立 | 22K08471 |
関連論文
| タイトル | DOI | データID | |
|---|---|---|---|
| 1 | Genetic and transcriptional landscape of plasma cells in POEMS syndrome. | doi: 10.1038/s41375-018-0348-x | JGAD000226 |
| 2 | Unraveling unique features of plasma cell clones in POEMS syndrome with single-cell analysis | doi: 10.1172/jci.insight.151482 | JGAD000395 |
制限公開データの利用者一覧
| 研究代表者 | 所属機関 | 国・州名 | 研究題目 | 利用データID | 利用期間 |
|---|---|---|---|---|---|
| 浜田 道昭 | 早稲田大学 理工学術院 | 日本 | RNA標的創薬データベースの構築 | JGAD000226 | 2022/12/26-2025/03/31 |
| 奥野 龍禎 | 大阪大学大学院医学系研究科 神経内科学講座 | 日本 | 神経筋疾患の病態解明 | JGAD000226, JGAD000395 | 2024/11/26-2030/03/31 |
